外泌体分离方法简介

来源：中为咨询www.zwzyzx.com 【日期：2016-08-11 11:36:18】【打印】【关闭】

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外泌体常见提取方法比较

1)差速离心法是最常用的外泌体纯化手段，采用低速离心、高速离心交替进行，可分离到大小相近的囊泡颗粒。

2)密度梯度离心将样本和梯度材料一起超速离心，样品中的不同组分沉降到各自的等密度区，分为连续和不连续梯度离心法。用于密度梯度离心法的介质要求对细胞无毒，在高浓度时粘度不高且易将pH调至中性。

3)色谱法，或者称为体积排阻层析法根据凝胶孔隙的孔径大小与样品分子尺寸的相对关系而对溶质进行分离的分析的方法。样品中大分子不能进入凝胶孔，只能沿多孔凝胶粒子之间的空隙通过色谱柱，首先被流动相洗脱出来；小分子可进入凝胶中绝大部分孔洞，在柱中受到更强地滞留，更慢地被洗脱出。

4)过滤利用不同截留相对分子质量（MWCO）的超滤膜对样品进行选择性分离，便可获得外泌体。这方法简单，好操作，但是特异性低。

5)基于聚合物的沉淀法（主要是PEG）将含有聚合物的沉淀溶液与生物体液混合，4℃温育，低速离心。用于基于聚合物的沉淀最常见的聚合物之一是聚乙二醇（PEG）。使用该聚合物的沉淀具有许多优点，包括对分离的外泌体温和的影响和使用中性pH。

6)免疫分离法外泌体表面有其特异性标记物（如CD63、CD9），用包被抗标记物抗体的磁珠与外泌体孵育，即可将外泌体吸附并分离出来。这种方法可以保证外泌体形态的完整，特异性高、操作简单、不需要昂贵的仪器设备,但是非中性pH和非生理性盐浓度会影响外泌体生物活性，不便进行下一步的实验。

目前外泌体的研究比较少，暂时还没有上市的产品。但是外泌体所含的信息丰富，便于富集，同时易于保存，是很有希望体外诊断对象。

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